2020版《中國藥典》-不溶性微粒檢查法

本法系用以檢查靜脈用注射劑（溶液型注射液、注射用無菌粉末、注射用濃溶液）及供靜脈注射用無菌原料藥中不溶性微粒的大小及數(shù)量。

本法包括光阻法和顯微計數(shù)法。當光阻法測定結(jié)果不符合規(guī)定或供試品不適于用光阻法測定時，應(yīng)采用顯微計數(shù)法進行測定，并以顯微計數(shù)法的測定結(jié)果作為判定依據(jù)。

光阻法不適用于黏度過高和易析出結(jié)晶的制劑，也不適用于進人傳感器時容易產(chǎn)生氣泡的注射劑。對于黏度過高，采用兩種方法都無法直接測定的注射液，可用適宜的溶劑稀釋后測定。試驗環(huán)境及檢測試驗操作環(huán)境應(yīng)不得引人外來微粒，測定前的操作應(yīng)在潔凈工作臺進行。玻璃儀器和其他所需的用品均應(yīng)潔凈、無微粒。本法所用微粒檢查用水（或其他 適 宜 溶 劑 ），使用前須經(jīng)不大于 1.0?的微孔濾膜濾過。

取微粒檢查用水（或其他適宜溶劑）符合下列要求：光阻法 取 50m l測定，要求每10m l含10?及 10?以上的不溶性微粒數(shù)應(yīng)在1 0粒以下，含 25?及 25?以上的不溶性微粒數(shù)應(yīng)在 2 粒以下。顯微計數(shù)法取50m l測定，要求含10Hm及 10?以上的不溶性微粒數(shù)應(yīng)在 2 0粒以下，含 25?及25?以上的不溶性微粒數(shù)應(yīng)在5 粒以下。

一、（光阻法）

測定原理當液體中的微粒通過一窄細檢測通道時，與液體流向垂直的入射光，由于被微粒阻擋而減弱，因此由傳感器輸出的信號降低，這種信號變化與微粒的截面積大小相關(guān)。

對儀器的一般要求儀器通常包括取樣器、傳感器和數(shù)據(jù)處理器三部分。

測量粒徑范圍為2? 100?，檢測微粒濃度為0? 10 000個/ml。

儀器的校準所用儀器應(yīng)至少每6 個月校準一次。

(1) 取樣體積待儀器穩(wěn)定后 ，取多于取樣體積的微粒檢查用水置于取樣杯中，稱定重量，通過取樣器由取樣杯中量取一定體積的微粒檢查用水后，再次稱定重量。以兩次稱定的重量之差計算取樣體積。連續(xù)測定3 次 ，每次測得體積與量取體積的示值之差應(yīng)在± 5 % 以內(nèi)。測定體積的平均值與量取體積的示值之差應(yīng)在± 3 % 以內(nèi)。也可采用其他適宜的方法校準，結(jié)果應(yīng)符合上述規(guī)定。

(2) 微粒計數(shù)取相對標準偏差不大于 5 % ，平均粒徑為 10?的標準粒子，制 成 每 lm l中 含 1000? 1500微粒數(shù)的懸浮液，靜 置 2 分鐘脫氣泡，開啟攪拌器，緩慢攪拌使其均勻（避免氣泡產(chǎn)生），依法測定3 次，記 錄 5?通道的累計計數(shù)，棄初測定數(shù)據(jù)，后兩次測定數(shù)據(jù)的平均值與已知粒子數(shù)之差應(yīng)在±2 0 %以內(nèi)。

(3) 傳感器分辨率取相對標準偏差不大于 5 % ，平均粒徑為10? 的標準粒子（均值粒徑的標準差應(yīng)不大于1?)，制 成 每 lm l中 含 1000? 1 50 0微粒數(shù)的懸浮液，靜置 2 分鐘脫氣泡，開啟攪拌器，緩慢攪拌使其均勻（避免氣泡產(chǎn)生），依法測定化8?、10?和 12?三個通道的粒子數(shù) ，計 算 8?與10?兩個通道的差值計數(shù)和10?與兩個通道的差值計數(shù)，上述兩個差值計數(shù)與10?通道的累計計數(shù)之比都不得小于6 8 % 。若測定結(jié)果不符合規(guī)定 ，應(yīng)重新調(diào)試儀器后再次進行校準 .符合規(guī)定后方可使用。

如所使用儀器附有自檢功能，可進行自檢。

檢查法

(1) 標示裝量為25m l或 25m l以上的靜脈用注射液或注射用濃溶液除另有規(guī)定外，取供試品至少4 個 ，分別按下法測定：用水將容器外壁洗凈，小 心 翻 轉(zhuǎn) 2 0 次，使溶液混合均勻，立即小心開啟容器，先倒出部分供試品溶液沖洗開啟口及取樣杯，再將供試品溶液倒入取樣杯中，靜 置 2 分鐘或適當時間脫氣泡，置于取樣器上（或?qū)⒐┰嚻啡萜髦苯又糜谌悠魃希ｉ_啟攪拌，使溶液混勻（避免氣泡產(chǎn)生），每個供試品依法測定至少3 次，每次取樣應(yīng)不少于5ml，記錄數(shù)據(jù)，棄初次測定數(shù)據(jù)，取后續(xù)測定數(shù)據(jù)的平均值作為測定結(jié)果。

標示裝量為25m l以下的靜脈用注射液或注射用濃溶液 除 另 有 規(guī) 定 外 ，取供試品至少4 個 ，分別按下法測定：用水將容器外壁洗凈，小心翻轉(zhuǎn) 2 0 次 ，使溶液混合均勻，靜置 2 分鐘或適當時間脫氣泡，小心開啟容器，直接將供試品容器置于取樣器上，開啟攪拌或以手緩緩轉(zhuǎn)動，使溶液混勻（避免產(chǎn)生氣泡），由儀器直接抽取適量溶液（以不吸入氣泡為限），測定并記錄數(shù)據(jù)，棄初次測定數(shù)據(jù)，取后續(xù)測定數(shù)據(jù)的平均值作為測定結(jié)果。

（2)項下的注射用濃溶液如黏度太大，不便直接測定時，可經(jīng)適當稀釋，依法測定。也可采用適宜的方法，在潔凈工作臺小心合并至少4個供試品的內(nèi)容物（使總體積不少于 25ml)，置于取樣杯中，靜 置 2 分鐘或適當時間脫氣泡，置于取樣器上。開啟攪拌，使溶液混勻（避免氣泡產(chǎn)生），依法測定至少4 次，每次取樣應(yīng)不少于5ml。棄初測定數(shù)據(jù)，取后續(xù)3次測定數(shù)據(jù)的平均值作為測定結(jié)果，根據(jù)取樣體積與每個容器的標示裝置體積，計算每個容器所含的微粒數(shù)。

(3) 靜脈注射用無菌粉末除另有規(guī)定外 ，取供試品至少4個 ，分別按下法測定：用水將容器外壁洗凈，小心開啟瓶蓋，精密加人適量微粒檢查用水（或適宜的溶劑），小心蓋上瓶蓋，緩緩振搖使內(nèi)容物溶解，靜 置 2 分鐘或適當時間脫氣泡，小心開啟容器，直接將供試品容器置于取樣器上，開啟攪拌或以手緩緩轉(zhuǎn)動，使溶液混勻(避免氣泡產(chǎn)生），由儀器直接抽取適量溶液（以不吸人氣泡為限），測定并記錄數(shù)據(jù) ；棄次測定數(shù)據(jù)，取后續(xù)測定數(shù)據(jù)的平均值作為測定結(jié)果。

 也可采用適宜的方法，取至少4 個供試品，在潔凈工作臺上用水將容器外壁洗凈，小心開啟瓶蓋，分別精密加人適量微粒檢查用水（或適宜的溶劑），緩緩振搖使內(nèi)容物溶解，小心合并容器中的溶液（使總體積不少于25ml)，置于取樣杯中，靜 置 2 分鐘或適當時間脫氣泡，置于取樣器上。開啟攪拌，使溶液混勻（避免氣泡產(chǎn)生），依法測定至少4 次 ，每次取樣應(yīng)不少于5ml，棄初次測定數(shù)據(jù)，取后續(xù)測定數(shù)據(jù)的平均值作為測定結(jié)果。

供注射用無菌原料藥按各品種項下規(guī)定，取供試品適量（相當于單個制劑的大規(guī)格量)4份，分別置取樣杯或適宜的容器中，照上述（3)法 ，自 “精密加入適量微粒檢查用水（或適宜的溶劑），緩緩振搖使內(nèi)容物溶解”起 ，依法操作，測定并記錄數(shù)據(jù)，棄初次測定數(shù)據(jù)，取后續(xù)測定數(shù)據(jù)的平均值作為測定結(jié)果。

結(jié)果判定

(1) 標示裝量為100m l或 100m l以上的靜脈用注射液除另有規(guī)定外，每 l m l 中含以上的微粒數(shù)不得過2 5 粒 ，含 2 5?及 25?以上的微粒數(shù)不得過3 粒 。

(2) 標示裝量為100m l以下的靜脈用注射液、靜脈注射用無菌粉末、注射用濃溶液及供注射用無菌原料藥除另有規(guī)定外，每個供試品容器（份）中 含 10?及 10?以上的微粒數(shù)不得過6000粒，含 25?及 25?以上的微粒數(shù)不得過600粒。

第二法（顯微計數(shù)法）

對儀器的 一 般要求儀器通常包括潔凈工作臺、顯微鏡、微孔濾膜及其濾器、平皿等。潔凈工作臺高效空氣過濾器孔徑為0.45?氣流方向由里向外。

顯微鏡雙筒大視野顯微鏡，目鏡內(nèi)附標定的測微尺(每格5? 10?)。坐標軸前后、左右移動范圍均應(yīng)大于30mm，顯微鏡裝置內(nèi)附有光線投射角度、光強度均可調(diào)節(jié)的照明裝置。檢測時放大100倍。

微孔濾膜孔徑0. 45?、直 徑 25m m或 13mm, —面印有間隔3m m的格柵；膜 上 如 有 10?及 10?以上的不溶性微粒，應(yīng) 在 5 粒以下，并 不 得 有 及 25?以上的微粒，必要時，可用微粒檢査用水沖洗使符合要求。

檢查前的準備在潔凈工作臺上將濾器用微粒檢查用水(或其他適宜溶劑）沖洗至潔凈，用平頭無齒鑷子夾取測定用濾膜，用微粒檢查用水（或其他適宜溶劑）沖洗后，置濾器托架上；固定濾器，倒置，反復用微粒檢查用水（或其他適宜溶劑）沖洗濾器內(nèi)壁，控干后安裝在抽濾瓶上，備用。

檢查法

(1) 標示裝量為25m l或 25m l以上的靜脈用注射液或注射用濃溶液除另有規(guī)定外，取供試品至少4 個 ，分別按下法測定：用水將容器外壁洗凈，在潔凈工作臺上小心翻轉(zhuǎn)2 0次 ，使溶液混合均勻，立即小心開啟容器，用適宜的方法抽取或量取供試品溶液25ml，沿濾器內(nèi)壁緩緩注入經(jīng)預(yù)處理的濾器(濾膜直徑25mm)中。靜 置 1 分鐘，緩緩抽濾至濾膜近干，再用微粒檢查用水25ml，沿濾器內(nèi)壁緩緩注入，洗滌并抽濾至濾膜近干，然后用平頭鑷子將濾膜移置平皿上(必要時，可涂抹極薄層的甘油使濾膜平整），微啟蓋子使濾膜適當干燥后，將平皿閉合，置顯微鏡載物臺上。調(diào)好入射光 ，放 大 100倍進行顯微測量，調(diào)節(jié)顯微鏡至濾膜格柵清晰 ，移動坐標軸，分別測定有效濾過面積上長粒徑大于10?和 25?的微粒數(shù)。計算三個供試品測定結(jié)果的平均值。

(2) 標示裝量為25m l以下的靜脈用注射液或注射用濃溶液除另有規(guī)定外 ，取供試品至少4 個 ，用水將容器外壁洗凈 ，在潔凈工作臺上小心翻轉(zhuǎn)2 0 次 ，使混合均勻，立即小心開啟容器，用適宜的方法直接抽取每個容器中的全部溶液 ，沿濾器內(nèi)壁緩緩注人經(jīng)預(yù)處理的濾器（濾膜直徑13mm)中，照上述（1)同法測定。

(3) 靜脈注射用無菌粉末及供注射用無菌原料藥除另有規(guī)定外，照光阻法中檢査法的（3)或 （4)制備供試品溶液，同上述（1)操作測定。

結(jié)果判定

(1) 標示裝量為 100m l或 100m l以上的靜脈用注射液除另有規(guī)定外，每 lm l中 含 10? 及10?以上的微粒數(shù)不得 過 1 2粒 ，含 25?及 25?以上的微粒數(shù)不得過2 粒

(2) 標示裝量為100m l以下的靜脈用注射液、靜脈注射用無菌粉末、注射用濃溶液及供注射用無菌原料藥除另有規(guī)定外，每個供試品容器（份）中 含 10?及10?以上的微粒數(shù)不得過3000粒，含 25?及25?以上的微粒數(shù)不得過300 粒 。